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國產(chǎn)固相萃取儀流動相時應(yīng)考慮的方面

更新時間:2016-01-12      點擊次數(shù):1949
   國產(chǎn)固相萃取儀是應(yīng)用為廣泛的非性鍵合相,它對各種類型的化合物都有很強的適應(yīng)能力。短鏈烷基鍵合相能用于性化合物的分離,而苯基鍵合相適用于分離芳香化合物。分離非性和性較弱的化合物可選擇非性鍵合相。利用特殊的反相色譜技術(shù),例如反相離子抑制技術(shù)和反相離子對色譜法等,非性鍵合相也可用于分離離子型或可離子化的化合物。
  個理想的國產(chǎn)固相萃取儀流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后,強溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,相應(yīng)的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加,相應(yīng)的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數(shù)。塔板數(shù)N般與流動相的粘度成反比。所以選擇國產(chǎn)固相萃取儀流動相時應(yīng)考慮以下幾個方面:
 ?、倭鲃酉鄳?yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
 ?、诩兌?。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。
 ?、郾仨毰c檢測器匹配。國產(chǎn)固相萃取儀使用UV檢測器時,所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收,或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時,應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。
 ?、苷扯纫停☉?yīng)<2cp)。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時間延長。選擇沸點在100℃以下的流動相。
 ?、輰悠返娜芙舛纫m宜。如果溶解度欠佳,國產(chǎn)固相萃取儀樣品會在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會使柱子惡化。
  ⑥樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。
  國產(chǎn)固相萃取儀分離中等性和性較強的化合物可選擇性鍵合相。氰基鍵合相對雙鍵異構(gòu)體或含雙鍵數(shù)不等的環(huán)狀化合物的分離有較好的選擇性。氨基鍵合相具有較強的氫鍵結(jié)合能力,對某些多官能團化合物如甾體、強心甙等有較好的分離能力;氨基鍵合相上的氨基能與糖類分子中的羥基產(chǎn)生選擇性相互作用,故國產(chǎn)固相萃取儀被廣泛用于糖類的分析,但它不能用于分離羰基化合物,如甾酮、還原糖等,因為它們之間會發(fā)生反應(yīng)生成堿。二醇基鍵合相適用于分離有機酸、甾體和蛋白質(zhì)。
  國產(chǎn)固相萃取儀進樣器按照進樣方式的不同,可分為三種:分別是隔膜式進樣、注射器停流進樣和六通閥進樣。隔膜進樣是指用微量注射器將樣品注入與色譜柱相連的進樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得佳的柱效,且價格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上),此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),國產(chǎn)固相萃取儀使進樣重復(fù)性只能達到1~2%,常規(guī)分析使用受到限制。
 

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